# RNA-seq QC



[TOC]

RNA-seq下游数据分析-ballgown到报告。 以Rscript为主，对接PGx RNA-seq choppy现有pipeline，到生成RNA-seq分析报告所需的rds和csv文件。

## 整体流程图

包括一下几个文件：

1. **RNAseq_sexcheck.R**：基于表达水平推测样本的性别


# Quick start

1. 准备文件：

   1. 表达谱

2. 确认事项：

   1. 所在机器的R/bioconductot安装包已完成（请参考library节查看）

      服务器：10.157.72.53已完成包的安装

   2. 代码

      1. 代码：RNAseq_sexcheck.R
      2. 参考文件：sexgenelist.txt

3. 运行以下命令：

   ```shell
   Rscript RNAseq_sexcheck.R -i geneexp_log2fpkm.txt 
   ```



   4. 将结果上传至报告系统所在服务器，并编辑{报告模板.md}的第一部分(实验目的、主要结论)，完成并运行报告。


## RNAseq_sexcheck.R

### 功能简介

基于表达水平推测样本的性别。

注意：如果数据经过低表达水平过滤，那么性别特异基因可能会被过滤掉而无法进行准确预测。 



### 代码参数

```shell
Usage: Rscript RNAseq_sexcheck.R [options]


Options:
	-o OUT_DIR, --out_dir=OUT_DIR
		The output directory [default ./]

	-i INPUT, --input=INPUT
		The input expression files. required!

	-e TYPE_GENE_ID, --type_gene_id=TYPE_GENE_ID
		The type of gene symbol. Could be either of EnsemblID/EntrezID/GeneSymbol [default: EnsemblID]

	-b FALSE, --pre_lowexpr_filtered=FALSE
		Whether pre-filterd low expressed genes in the input file or not. [default: FALSE]
		
	-s SEX_GENES, --sex_genes=SEX_GENES
		File in tab-delimited format sex gene list with EnsemblID/EntrezID/GeneSymbol. [default: ./sexgenelist.txt ]

	-p PROJECT_CODE, --project_code=PROJECT_CODE
		Project code, which is used as prefix of output file. [default: rnaseq]

	-h, --help
		Show this help message and exit

```

**参数解释**

| 参数                                         | 取值类型   | 解释                                                         | 例如              |
| -------------------------------------------- | ---------- | ------------------------------------------------------------ | ----------------- |
| -o OUT_DIR, --out_dir=OUT_DIR                | character  | 输出路径，默认为./。可加“/”也可不加“/”                       | ./                |
| -i INPUT, --input=INPUT                      | character  | 输入文件名，**必须输入。**输入表达谱必须是log scaled的tab分隔的表达谱，可以是[RNAseqDownstream2report](http://choppy.3steps.cn/yingyu/RNAseqDownstream2report)仓库RNAseq_1_ballgown.R/RNAseq_1_stringtie.R的输出文件。 | example.txt       |
| -e TYPE_GENE_ID, --type_gene_id=TYPE_GENE_ID | character  |                                                              |                   |
| -b FALSE, --pre_lowexpr_filtered=FALSE       | TRUE/FALSE | 输入的表达谱文件是否进行过低表达值过滤。                     | FALSE             |
| -s SEX_GENES, --sex_genes=SEX_GENES          | character  | 性别特异基因的文件                                           | ./sexgenelist.txt |
| -p PROJECT_CODE, --project_code=PROJECT_CODE | character  | project代号，输出文件的前缀，默认rnaseq                      | rnaseq            |
| -h, --help                                   |            | 查看帮助文档并退出                                           | -h                |



各样本的各PC值，choppy report所需的scatterplot图的rds和csv文件，（其中绘图时仅需rds文件，csv文件就看看）：

rnaseq_sexpredict.csv 逗号分隔的预测结果，包括两列，第一列为样本名（来自于输入文件的列名），第二列为预测的性别结果。
rnaseq_sexpredict.rds R对象

内容如下：

> Sample,Sex
>
> P1,Female
>
> P10,Female
>
> P11,Female
>
> P12,Male

### 运行示例

```shell
#最少输入
Rscript RNAseq_sexcheck.R -i geneexp_log2fpkm.txt 
#其他输入
Rscript RNAseq_sexcheck.R -i FUSCCTNBC_RNAseqShi.Complete_log2_448x45308_V15_190209.txt -p 111 -s ./sexgenelist.txt -e GeneSymbol
```



### choppy report

```
@data-table-js(dataUrl='/yourdir/data/rnaseq_sexpredict.csv')
```



# Example data

oss://choppy-app-example-data/RNAseqQC_example/ 13例RNA-seq数据。



## R library

R library used:

```R
library(optparse) #all
```



​	如果需要安装，运行

```R
install.packages("optparse")
```

​